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液相色譜柱的使用注意事項
更新時間:2018-10-26   點擊次數:7829次

1、 色譜柱的使用說明:

        (1)、色(se)譜(pu)柱使用前(qian)注意事項(xiang):色(se)譜(pu)柱的(de)(de)(de)儲存液無特(te)殊說(shuo)明(ming),均(jun)為評價(jia)報告所示的(de)(de)(de)流動相(xiang)。在(zai)使用前(qian),一定要(yao)注意色(se)譜(pu)柱的(de)(de)(de)儲存液與要(yao)分析樣品的(de)(de)(de)流動相(xiang)是否互溶。在(zai)反相(xiang)色(se)譜(pu)中,如(ru)用高濃度(du)的(de)(de)(de)鹽(yan)或(huo)緩沖液作洗(xi)脫(tuo)劑,應先用10%左(zuo)右的(de)(de)(de)低濃度(du)的(de)(de)(de)有(you)機相(xiang)洗(xi)脫(tuo)劑過(guo)渡一下(xia),否則緩沖液中的(de)(de)(de)鹽(yan)在(zai)高濃度(du)的(de)(de)(de)有(you)機相(xiang)中很容易析出,堵塞(sai)色(se)譜(pu)柱。

         (2)、流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang):流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中所(suo)(suo)使用(yong)(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)各種有機(ji)溶(rong)劑要盡可能使用(yong)(yong)(yong)(yong)色(se)譜(pu)純(chun),配流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)的(de)(de)(de)(de)水是(shi)超純(chun)水或全玻璃(li)器(qi)皿(min)的(de)(de)(de)(de)雙蒸水。如果將所(suo)(suo)配得流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)再經過(guo)0.45μm的(de)(de)(de)(de)濾(lv)膜過(guo)濾(lv)一次則更(geng)好,尤(you)其是(shi)含鹽的(de)(de)(de)(de)流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)。另外,裝流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)的(de)(de)(de)(de)容器(qi)和色(se)譜(pu)系(xi)統中的(de)(de)(de)(de)在(zai)線(xian)過(guo)濾(lv)器(qi)等裝置應(ying)該(gai)定期清(qing)洗或更(geng)換。以常規硅膠為基質的(de)(de)(de)(de)鍵合(he)(he)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)填(tian)料通常的(de)(de)(de)(de)PH值(zhi)(zhi)適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)是(shi)2.0-8.0,BDS C18適(shi)(shi)合(he)(he)于堿性(xing)化合(he)(he)物,PH值(zhi)(zhi)適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)為2.0-10.0。當(dang)必須要在(zai)PH值(zhi)(zhi)適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)范(fan)圍(wei)的(de)(de)(de)(de)邊界條件下使用(yong)(yong)(yong)(yong)色(se)譜(pu)柱(zhu)時,每(mei)次使用(yong)(yong)(yong)(yong)結束后(hou)立即用(yong)(yong)(yong)(yong)適(shi)(shi)合(he)(he)于色(se)譜(pu)柱(zhu)儲(chu)存并與(yu)所(suo)(suo)使用(yong)(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互(hu)溶(rong)的(de)(de)(de)(de)溶(rong)劑清(qing)洗,并*置換掉原來所(suo)(suo)使用(yong)(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)流(liu)(liu)動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)。  

        (3)、樣(yang)品(pin):樣(yang)品(pin)也要(yao)盡可能(neng)清潔,可選(xuan)用(yong)樣(yang)品(pin)過濾器或樣(yang)品(pin)預處(chu)理(li)柱(SPE)對樣(yang)品(pin)進行預處(chu)理(li);若樣(yang)品(pin)不(bu)便(bian)處(chu)理(li),要(yao)使用(yong)保(bao)護(hu)柱。在用(yong)正相(xiang)色譜(pu)法分析樣(yang)品(pin)時,所有的溶劑和樣(yang)品(pin)應嚴格脫水。

         2、 色譜柱的保存

        (1)、反相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)柱(zhu)每天實驗(yan)后(hou)的保養:使用(yong)緩(huan)沖液或含(han)鹽的流動(dong)相(xiang)(xiang),實驗(yan)完成(cheng)后(hou)應(ying)(ying)用(yong)10%的甲(jia)醇(chun)/水(shui)沖洗(xi)30分鐘,洗(xi)掉色譜(pu)(pu)柱(zhu)中的鹽,再用(yong)甲(jia)醇(chun)沖洗(xi)30分鐘。注意:不能用(yong)純(chun)水(shui)沖洗(xi)柱(zhu)子,應(ying)(ying)該在水(shui)中加(jia)入(ru)10%的甲(jia)醇(chun),防止將填(tian)料沖塌(ta)陷。

       (2)、長期(qi)保存(cun)色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu):如色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)要長時間(jian)保存(cun),必(bi)須存(cun)于合適的溶(rong)劑下(xia)。對(dui)于反相(xiang)柱(zhu)可(ke)以儲(chu)存(cun)于純(chun)甲醇或乙腈中(zhong),正相(xiang)柱(zhu)可(ke)以儲(chu)存(cun)于嚴格脫水后的純(chun)正己烷(wan)中(zhong),離子交換柱(zhu)可(ke)以儲(chu)存(cun)于水(含(han)防腐(fu)劑疊dan化鈉 )中(zhong),并將購買新(xin)色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)時附送的堵(du)(du)頭(tou)堵(du)(du)上。儲(chu)存(cun)的溫度是室(shi)溫。

         3、 色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,會出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰的現象,一般來說可能是柱效下降。

       (1)、反(fan)相(xiang)柱(zhu)的再生(sheng):依次采用20-30倍(bei)的色(se)譜柱(zhu)體積的甲醇(chun):水=10:90 (V/V),乙腈(jing),異丙醇(chun)作為流動相(xiang)沖(chong)洗(xi)色(se)譜柱(zhu),完(wan)成后再以相(xiang)反(fan)順序沖(chong)洗(xi)色(se)譜柱(zhu)。

       (2)、正相(xiang)柱(zhu)的(de)再生:依次以20-30倍(bei)色譜柱(zhu)的(de)體積的(de)正己烷、異丙醇、二氯甲(jia)烷、甲(jia)醇作為(wei)流(liu)動相(xiang)沖(chong)洗(xi)色譜柱(zhu),然后再以相(xiang)反的(de)順序沖(chong)洗(xi)色譜柱(zhu)。要注(zhu)意上(shang)述溶(rong)劑必(bi)須嚴格脫水。

          4、 色譜柱在使用過程中易出現的問題和解決辦法

         色譜柱在(zai)使用(yong)(yong)中zui常見的(de)問(wen)題就是柱壓升高(gao)(gao),如(ru)果柱壓是在(zai)長(chang)時間使用(yong)(yong)過程(cheng)中緩(huan)慢(man)增加,屬于(yu)正常現象(xiang)。但柱壓在(zai)使用(yong)(yong)過程(cheng)中突然升高(gao)(gao)(系統(tong)管路堵塞及壓力傳(chuan)感器故障(zhang)除外),可能的(de)原(yuan)因有如(ru)下(xia)幾(ji)點:

        (1)、色譜柱(zhu)頭的過濾篩板堵塞或污染(ran);

        (2)、色(se)譜柱頭的填(tian)料被樣(yang)品污(wu)染;

        (3)、色譜柱內(nei)緩沖液中的鹽遇(yu)到高濃度的甲(jia)醇(chun)或其他(ta)有機溶劑,形成(cheng)結晶析(xi)出;

        (4)、流(liu)動相PH值過大或過小(xiao)使固(gu)定相結構破(po)壞或溶解。

          解決辦法如下:

          (1)、如確定是色(se)(se)譜(pu)柱頭的(de)過濾(lv)篩板被污染,可以將(jiang)色(se)(se)譜(pu)柱反方向(xiang)用甲醇(chun)沖洗(xi)至正常壓力,或者卸下色(se)(se)譜(pu)柱頭,將(jiang)其放在10%的(de)稀硝酸內超聲清洗(xi)10分(fen)鐘(zhong),后(hou)再用純水(shui)超聲10分(fen)鐘(zhong),重新裝入色(se)(se)譜(pu)柱。

          (2)、如(ru)確定色(se)譜柱(zhu)頭(tou)的(de)填料(liao)被(bei)(bei)污(wu)染(ran),將柱(zhu)頭(tou)螺絲卸下,挖出柱(zhu)內(nei)前段(duan)被(bei)(bei)污(wu)染(ran)的(de)填料(liao),用相同的(de)柱(zhu)填料(liao)重新(xin)填入(ru),仔細(xi)修復后,重新(xin)安裝(zhuang)上柱(zhu)頭(tou)螺絲。

         (3)、如確定(ding)定(ding)是鹽結晶,用10%的(de)甲醇(chun)/水沖洗色譜柱使柱內(nei)鹽全部溶解,再換高(gao)濃度甲醇(chun)。

         (4)、如果因(yin)PH值(zhi)使(shi)用不當(dang),很難(nan)恢復。 

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